Salão no Palácio Santo Rood. Ele diz que a cidade tem tumultos. Alguém não familiarizado com ele na frente da multidão - mummers, mascarados, dançarinos com sinos, pessoas de capuz preto - ameaçou, previu e pediu às pessoas que não obedecessem à rainha. O cortesão da rainha Riccio confirma que também assiste de tempos em tempos enquanto as pessoas ouvem ansiosamente esses sermões. A página conta ainda que as pessoas invadiram a capela da rainha gritando: "O ninho dos papistas!", Que o bufão de Darnley, o marido da rainha, pulou no altar e começou a fingir ser um sermão, e as pessoas o responderam com dons zombeteiros. Rainha Mary Stuart em desespero. Ela sente o ódio do povo, a maioria dos cortesãos a abandonou; ela se pergunta como seu cristianismo pode ser tão diferente do cristianismo do povo da Escócia. Riccio propõe preparar imediatamente um decreto punindo os responsáveis ​​pelos distúrbios. Maria dita sua página, a página esclarece se o nome de Heinrich Darnley, o marido da rainha deve ser digitado. Maria hesita; ela suspeita que os distúrbios foram inspirados por ele - afinal, a multidão foi liderada pelo bufão do rei. Aqui Riccio lembra que ela é a rainha; ela é como o sol e tem o direito de punir de Deus. Ele exige que ligue imediatamente para o oficial de serviço para anunciar o decreto da rainha. Douglas entra. Maria diz para ele levar o papel para o chanceler real Morton, para que ele possa carimbar. Douglas examina o decreto e vê que ele não tem o nome do rei. Ele pergunta à rainha sobre isso. Riccio é responsável por ela. Douglas está perdendo a paciência. Ele exorta a rainha a não usar medidas sangrentas de supressão, sugerindo que ele vê isso como influência francesa ou italiana. Mas a rainha friamente o lembra de seu poder de eliminar os súditos desobedientes à sua vontade. Uma briga entre Riccio e Douglas, Douglas desafia Riccio a um duelo e jura que ele matará o veneziano amanhã. A rainha sai e leva Riccio embora. Douglas é deixado sozinho, ele está considerando um duelo. Morton entra. Douglas mostra o decreto. Morton é indeciso: tem medo da ira do rei e da rainha. Sem bater, Morton oferece ao rei. Nesse momento, Henry estava conversando com seu bobo da corte Nick, que o provoca com o fato de que a rainha tem poder real na Escócia, e Henry é apenas seu marido, que a rainha escolhe parentes próximos, por exemplo, este harpista italiano Riccio ... Neste momento, Morton traz um decreto infeliz. Rei com raiva, ele decide matar Riccio. O rei Lindsay entra na corte, ele chama o rei para caçar com o falcão recém-adquirido. Morton responde que o rei já tem uma ocupação hoje. Lindsay voluntariamente se junta à trama contra Riccio. Ele literalmente proíbe matar Riccio hoje à noite, porque ele deve matá-lo amanhã de manhã. Então, Henry, aproveitando o atraso, envia o bobo da corte ao astrólogo para descobrir qual é a localização das estrelas para suas intenções.

O astrólogo em seu laboratório (ele também é um alquimista) argumenta consigo mesmo que a experiência confirma a futilidade da ciência, que esse propósito, a vontade das estrelas dominam o homem, eliminam o bem e o mal. Nick entra, polvilha com humor, o astrólogo não é inferior a ele com humor. Nick relata que o rei o enviou para perguntar sobre o destino de Riccio e diz ao astrólogo para prever a morte de Riccio. O astrólogo responde que as estrelas dirão a ele, não as pessoas, e, por sua vez, prevê a morte do bobo da corte. Com isso ele sai. A página da rainha causada pelo astrólogo aparece. Page ama sua amante. O astrólogo diz para ele dizer à rainha que hoje o homem que ela ama morrerá. "Como, Botwell vai morrer hoje?" - exclama uma página. O astrólogo está intrigado. Ele tinha em mente Riccio e está correndo a página para avisá-lo sobre isso. Deixado sozinho, o astrólogo se pergunta - também apareceu pelas estrelas que Botwell estava de alguma maneira sombriamente conectado com a rainha - através de Marte, Saturno ... Botwell entra. Do seu monólogo, fica claro que ele inesperadamente se encontrou na casa de um astrólogo. Percebendo onde ele chegou, Botwell pergunta ao astrólogo quanto ele ainda resta para viver. O velho responde que três anos e que Botwell será rei. O botwell pega um frasco de veneno com o qual ele queria se suicidar, quer jogá-lo fora - e hesita. De fato, na atmosfera das intrigas do palácio, qualquer arma será útil. Ele está indo embora.

A página diz à rainha que Riccio virá em breve. A rainha está ansiosa por ele - na opinião dela, ele só permaneceu fiel a ela. "E Botvel?" A página pergunta. "Quem é Botvel?" - a rainha está interessada. Uma página surpresa diz a Mary que, enquanto passeava de barco, um vento forte arrancou uma rosa da cabeça da rainha, uma flor caiu na água. E então um dos cortesãos - Botvel - entrou correndo no barco e perseguiu assustadoramente o remador para pegar uma rosa da água. Depois de ouvir a história, Maria envia uma página para orar. Ela confessa a Deus que não tem mais forças para resistir ao seu amor por Botwell. A rainha sabe que na corte é considerada apaixonada por Riccio. Riccio entra. Maria relata um perigo mortal que o ameaça e se despede friamente, apontando-o para o navio que o levará a Roma. Desesperado, Riccio tenta implorar à rainha para cancelar a decisão de sair. A rainha é inflexível.

Heinrich, Morton e Lindsay aprenderam sobre a partida iminente de Riccio e rapidamente conferiram para matá-lo ou deixá-lo navegar. Então Douglas aparece e relata que Riccio já navegou. Douglas em desespero, ele anseia por vingança sangrenta, sua honra cavalheiresca é ferida. De repente, eles encontram uma página que traz à rainha um bilhete de Riccio - ele não saiu e estará com ela à noite. Os conspiradores tiram a nota.

Maria está ocupada bordando em seu quarto. Riccio, que veio, explica-lhe que ele não poderia ir embora, porque ele tem um duelo com Douglas pela manhã. Ele admite que não precisa da vida sem o amor dela. Ele pede a Mary para lhe dar uma coroa de rosas - ele plantará flores no altar em Roma ... Henry, Douglas e Dindsay entram e matam Riccio. Rainha desmaia. Douglas é atingido por vergonha e horror - ele voluntariamente se retira para o exílio. Henry está preocupado se a rainha o odiará. Lindsay leva o rei embora, sussurrando para ele sobre a próxima caçada. A rainha Botwell é convidada pela rainha. Maria recupera o juízo, vê Botvel e confessa seu amor a ele. O botvel a força a admitir que ela quer a morte de Henry e lhe dá seu frasco de veneno, dizendo que este é um comprimido para dormir. Maria dá ao rei esse "remédio", mas o veneno bebe o bufão. No entanto, nada pode parar a intriga assassina - Botwell explode a casa do rei Henry. À distância, os crescentes gritos da multidão são ouvidos. O botvel com a rainha está escondido.